《动物微生物学》实验教学大纲

课程名称:《动物微生物学》

课程属性 专业基础 

一、动物微生物学实验课程简介

　　动物微生物学实验是畜牧兽医、特种动物养殖、饲料动物营养等专业的重要的专业基础实验课程之一，其应用性很强，在畜禽疾病诊断和预防等方面发挥着重要的作用。通过开展微生物实验操作和技能训练，可培养学生的解决实际问题的能力，为后续专业实验课打下良好基础。随着分子生物学的发展，动物微生物学研究方法与生物技术结合得更加紧密，因此，熟悉掌握动物微生物学方法和技术对其它很多学科的发展也有直接的影响。

二、实验教学目的与基本要求

　　实验目的：动物微生物学实验目的是为了加深和巩固对理论知识的理解，初步掌握微生物学与免疫学操作的基本技术与技能，包括经典、常规和现代的微生物学方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。并使学生养成严肃认真的科学态度，为今后的实际工作打下良好的基础。

　　基本要求：动物微生物学实验注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，实验课前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤；在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，善于发现新现象；在实验中要谨慎操作，严防实验室污染或散布病原，但也不要因此而产生恐惧心理，影响实验的进行。

三、实验项目名称与学时分配

四、实验方式与基本要求

　　实验方式：

　　1、以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示。

　　2、对实验中所出现的一些现象多向学生提出问题，使它们学会分析结果，并与理论知识有机结合。

　　3、根据实验的进行程度，引导学生更深入思考，逐步树立他们的创新意思。

　　4、严格要求使操作技能规范化，老师作示范，强调其要点，学生自己练习。

　　基本要求：

　　1、注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，克服盲目追求新颖而忽视基础的倾向。

　　2、实验课前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤。

　　3、在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，要善于发现新现象。

　　4、树立密切合作的风气，包括学生与老师、班与班、组与组、组长与组员之间的密配合。

五、考核方式及成绩评定

　　实验操作考试及平时成绩各占50%,并占课程总成绩的30%;

六、教学参考书

　　1.甘肃农业大学. 兽微生物学实验指导.中国农业出版社,1980

　　2.饶邦忠.医学微生物学实验技术.武汉大学出版社,2002

七.实验内容安排

实验一 显微镜油浸系的使用及细菌基本形态观察

一、实验学时:2学时

二、实验目的:

1.正确掌握使用及护理显微镜的方法，特别是油浸系的使用及护理。

2.认识细菌的基本形态和构造。

三、实验内容: 显微镜的构造,油浸系的原理及使用方法, 显微镜的保护, 常见细菌(如大肠杆菌,链球菌等)正常形态的观察

四、实验要求: 学生必须学会最基本的显微镜适用.

五、实验所需仪器设备: 显微镜,细菌标准片。

实验二 细菌抹片的制备及染色

一、实验学时:2学时

二、实验目的:

1.学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。

2.初步认识细菌的形态特征。

3 .巩固显微镜(油镜)的使用方法和无菌操作技术。

三、实验内容:细菌的涂片与革兰氏染色法

四、实验要求: 认识革兰氏染色的原理及反应特性

五、实验所需仪器设备: 显微镜,载玻片, 革兰氏染液;酒精灯;

实验三 培养基的制备

一、实验学时:2学时

二、实验目的:

        1.掌握一般培养基制备的原则和要求。

2.熟悉一般培养基制备的过程。

三、实验内容:牛肉膏蛋白胨培养基的制备。

四、实验要求: 学生通过本次实验学会最基础培养基的制备。

五、实验所需仪器设备:电炉,天平,烧杯,量筒, 牛肉膏,蛋白胨等。

实验四 细菌的分离培养及培养性状的观察

一、实验学时:4学时

二、实验目的:

    1.学习、掌握需氧菌和厌氧菌分离培养的基本要领和技术。

2.了解细菌的菌落形态及其在各种培养基上的培养性状。

3.了解培养性状对细菌鉴别的重要意义。

4.掌握钓菌、纯培养及移植技术。

三、实验内容:微生物的分离与纯化,微生物的培养特征。

四、实验要求:掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。

五、实验所需仪器设备:电炉,平皿, 酒精灯;接种棒,菌种。

实验五 真菌的分离培养及形态观察

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 

1.掌握真菌分离培养方法。

2.认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。

3.了解真菌载片培养法。

4.掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。

三、实验内容:真菌分离培养方法的分离与纯化, 真菌菌落的特征

四、实验要求:掌握真菌分离培养方法, 认识真菌菌落的特征;

五、实验所需仪器设备:电炉,平皿, 酒精灯;接种棒,菌种;显微镜;恒温培养箱;

实验六 细菌的生化试验

一、实验学时:4学时

二、实验目的:

      1.通过本试验加深对细菌生化反应原理和意义的理解；

2.掌握常规细菌生化试验操作方法

三、实验内容:五糖发酵试验,甲基红实验,二乙酰实验,吲哚实验,三糖铁实验,柠檬酸盐利用实验;

四、实验要求:学会实践中用生化实验鉴别微生物;

五、实验所需仪器设备: 酒精灯;接种棒;菌种; 恒温培养箱;生化试剂;

实验七 动物试验法

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 掌握实验动物的保定、接种、采血以及剖检的方法

三、实验内容: 鸡,小白鼠,及家兔的保定,接种以及采血法;

四、实验要求:通过本实验能学会最基本的动物实验方法并会用于实践中;

五、实验所需仪器设备:注射器,采血管,剪刀,镊子,抗凝剂;

实验八 凝集试验

一、实验学时:2学时

二、实验目的:

      1.熟悉平板凝集反应和试管凝集反应的操作技术，通过对凝集结果的观察和记录，

了解凝集的判定和对被检牲畜试验结果的判定。

2.了解间接血凝反应试验过程和操作方法

三、实验内容: 试管凝集反应,平板凝集反应（以布氏杆菌为例）;

四、实验要求:通过本实验能学会凝集实验方法并会用于实践中;

五、实验所需仪器设备:载玻片,火材棒, 布氏杆菌凝集试剂;

实验九 沉淀反应

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 

1.了解沉淀反应在预防医学和兽医学中的意义。

2.初步掌握炭疽沉淀原的制备和环状沉淀反应，琼脂扩散反应的操作方法

三、实验内容:琼脂扩散沉淀反应（以法氏囊为例）

四、实验要求: 通过本实验能学会琼脂扩散反应的操作方法并会用于实践中;

五、实验所需仪器设备: 法氏囊沉淀抗原与抗体;琼扩平板;酒精灯;移液枪;96孔板;

实验十一 荧光抗体染色法

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 

1.通过试验，进一步理解荧光抗体染色法的原理。

2.掌握荧光抗体染色法的基本操作方法。

三、实验内容: 荧光抗体染色法的基本操作（以猪兰耳病为例）

四、实验要求: 通过本实验能掌握荧光抗体染色法的基本操作方法

五、实验所需仪器设备: 湿盒,荧光抗体诊断液, 玻片, 纱布, 荧光显微镜, 温箱等

实验十二 酶联免疫吸附试验（ELISA）

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 

1.掌握ELISA的基本原理

2.熟悉ELISA（间接法）的操作方法

三、实验内容: ELISA（间接法）的操作方法(以猪兰耳病为例）

四、实验要求: 通过本实验能掌握ELISA（间接法）的基本操作方法

五、实验所需仪器设备: 聚苯乙烯40孔平底反应板、加样器、滴管、滤纸、微量混合器、酶标分光光度计、包被液、稀释液、洗涤液、底物溶液、终止液、酶标抗体、标准抗原、标准阴、阳性血清、检样;

实验十三 主要病原菌的认识（一）

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 认识结核分枝杆菌、布氏杆菌、炭疽杆菌、猪丹毒杆菌和多杀性巴氏杆

菌的形态及特殊的染色特性和培养特性。

三、实验内容:结核分枝杆菌、布氏杆菌、炭疽杆菌、猪丹毒杆菌和多杀性巴氏杆菌的

形态及特殊的染色特性染色特性观察和培养特性的认识;

四、实验要求: 通过本实验实践中能基本认识结核分枝杆菌、布氏杆菌、炭疽杆菌、猪

丹毒杆菌和多杀性巴氏杆菌的形态及培养特性,并记住个别细菌的特殊染色特性;

五、实验所需仪器设备: 显微镜,标准细菌涂片, 几种细菌的菌落及菌液培养物;

实验十四 主要病原菌的认识（二）

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 认识葡萄球菌、链球菌、鼻疽杆菌、肉毒梭菌、魏氏梭菌的形态染色特

性和培养特性。

三、实验内容:葡萄球菌、链球菌、肉毒梭菌、魏氏梭菌的形态染色特性和培养特性。

四、实验要求: 通过本实验实践中能基本认识葡萄球菌、链球菌、肉毒梭菌、魏氏梭菌

的形态及培养特性,并了解肉毒梭菌、魏氏梭菌有关芽孢的特点;

五、实验所需仪器设备: 显微镜,标准细菌涂片, 几种细菌的菌落及菌液培养物;

实验十五 主要病原菌的认识（三）

一、实验学时:2学时

二、实验目的: 通过本次试验，了解沙门氏菌、钩端螺旋体、常见的病原真菌的形态特

征及培养特性。掌握鉴别要点。

三、实验内容:沙门氏菌、大肠杆菌、钩端螺旋体、黄曲霉、烟曲霉、流行性淋巴管炎

囊球菌、酵母菌的形态染色特性和培养特性。

四、实验要求: 通过本实验实践中能基本认识沙门氏菌、钩端螺旋体、黄曲霉、烟曲霉、

流行性淋巴管炎囊球菌、酵母菌的形态染色特性和培养特性。鉴别沙门氏菌、大肠杆

菌的形态以及酵母细胞死活的染色方法;

五、实验所需仪器设备: 显微镜,标准细菌涂片, 几种细菌的菌落及菌液培养物;

实验十九 病毒学实验技术

一、实验学时:4学时

二、实验目的: 通过实验掌握常用的病毒学实验技术和诊断方法;

三、实验内容:鸡胚的接种与病毒血凝性检测;

四、实验要求: 通过本实验掌握常见的几种鸡胚的接种方法以及学会病毒血凝性检测;

五、实验所需仪器设备: 鸡胚,照蛋器,注射器, 加样器,96孔板,酒精棉,碘酊,铅笔等